第1434章摸着石头过河

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，在检测到异常电活动时，发射黄光激活NpHR，增强局部抑制。「
    「这太超前了，「唐顺倒吸一口凉气，「病毒载体丶光遗传学丶闭环调控，三个技术迭加在一起，任何一个出问题都是灾难。「
    「但如果我们不做，「杨平看着他，「M7可能会在恢复运动功能的同时，承受慢性疼痛的折磨。你愿意看到它一边走路，一边痛得发抖吗？没有在分子层面提出有效解决方法之前，这是最好的方法。「
    唐顺张了张嘴，没有说话。
    韦伯打破了沉默：「杨教授，你的方案在理论上是成立的。但光遗传学在灵长类脊髓中的应用，还没有先例。我们需要做大量的预实验，验证病毒载体的靶向性丶光刺激的深度丶和长期安全性。「
    「我知道，「杨平说，「所以我们分两步走。第一步，体外验证，在M7的脊髓切片上，测试病毒载体的转染效率和光刺激的效果。第二步，如果体外成功，再在M7身上做体内实验。「
    「时间上呢？「伊娃问，「按照你的时间线，我们最多还有两到三周的时间窗。「
    「体外验证需要一周，「杨平算了算，「如果成功，体内实验需要两到三天准备，一周内可以完成植入。刚好赶上。「
     「如果失败呢？「曼因斯坦问。
    杨平沉默了几秒钟，然后说：「那就用备选方案，鞘内注射巴氯芬，一种GABA_B受体激动剂。效果不如光遗传学精准，但可以全身性增强抑制性调控。副作用是肌张力降低，可能影响运动恢复。「
    「所以光遗传学是A方案，巴氯芬是B方案，「韦伯总结，「我同意这个计划。但有一个条件，体外验证必须由我亲自来做，光遗传学是我的老本行，我在海德堡的时候做过类似的实验。「
    「好，「杨平点头，「韦伯教授负责体外验证，伊娃负责闭环传感器升级，莉娜负责数据分析模型，汉斯负责病毒载体和光纤制备。唐顺，你协调所有资源，确保一周内出结果。「
    「明白！「
    体外验证开始。
    韦伯亲自主刀，从M7的脊髓损伤区取了一小块组织，大约两立方毫米，放在冰冷的人工脑脊液中，切成了三百微米厚的薄片。这些薄片被转移到培养皿中，保持存活状态，可以持续记录电生理活动四到六个小时。
    病毒载体是AAV9-hSyn-NpHR-EYFP，一种经过改造的腺相关病毒。AAV9对神经元有高度的嗜性，hSyn启动子确保NpHR只在神经元中表达，EYFP作为萤光标记，方便在显微镜下观察转染效率。
    韦伯把病毒溶液滴在脊髓切片上，孵育两个小时。然后用PBS冲洗三遍，放在共聚焦显微镜下观察。
    「转染效率，「他调整着焦距，「大约百分之三十五。「
    「百分之三十五，「曼因斯坦在旁边记录，「够吗？「
    「理论上，脊髓背角的抑制性中间神经元占总神经元数量的百分之二十到三十。百分之三十五的转染效率，意味着大部分抑制性神经元都能被靶向，足够了。「
    下一步是电生理验证，韦伯把一片转染过的脊髓切片放到电生理记录槽中，用玻璃微电极记录背角神经元的自发放电。同时，他在切片的上方放置了一根直径两百微米的光纤，连接到一台黄色雷射器上。
    「基线放电频率，「他看着示波器，「每秒五赫兹，正常范围。「
    然后他打开了雷射器。一束微弱的黄光透过光纤，照射在脊髓切片的表面。
    「光强，一毫瓦每平方毫米，波长，五百九十纳米。「
    示波器上的波形变了，自发放电频率从每秒五赫兹降到了每秒一赫兹，降幅百分之八十。
    「抑制效果确认，「韦伯的声音很平静，但曼因斯坦注意到他的手微微颤抖，「NpHR被激活后，氯离子内流，神经元超极化，放电减少。「
    「可逆吗？「杨平问。
    韦伯关掉雷射器，十秒钟后，放电频率恢复到每秒四点八赫兹。
    「完全可逆。「
    会议室里爆发出一阵压抑的欢呼。唐顺和汉斯击了一下掌，莉娜在笔记本上飞快地敲着字，伊娃难得地露出了一丝微笑。
    但韦伯没有笑，他盯着那片脊髓切片，看了很久，然后说：「这只是体外，体内的环境复杂得多，炎症丶免疫反应丶胶质瘢痕丶血流变化。体外成功，不代表体内能成功。「
    「我知道，「杨平说，「但我们至少证明了，这个方向是对的，科研就是摸着石头过河。「
    「摸着石头过河？」
    韦伯捉摸着这句话，他赞叹：
    「这是富有哲理的一句话。」
    紧接着，体内实验也开始进行。
    这一次，手术的规模比前两次都大。杨平主刀，曼因斯坦协助，伊娃负责电生理监测，汉斯负责病

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